液體樣本鐵離子含量測試劑盒（比色法）
產(chǎn)品名稱：液體樣本鐵離子含量測試劑盒（比色法）
產(chǎn)品貨號：XFH3001
規(guī)格：100T
儲(chǔ)存條件：4℃
有效期：6個(gè)月
描述：鐵是人體必需的元素之一，對人體的新陳代謝和身體健康具有重要作用，血液中鐵的含量不足，就會(huì)造成缺鐵性貧血。鐵存在于人體所有的細(xì)胞內(nèi)，各組織、器官包括各內(nèi)分泌腺都含有鐵。肝臟、脾臟和肺組織內(nèi)含量較為豐富。成人體內(nèi)含鐵3～5克，大部分都以蛋白質(zhì)復(fù)合物形式存在，極少部分以離子的形態(tài)存在。本試劑盒采用亞鐵嗪比色法可以定量液體鐵離子含量，線性范圍5~300uM。產(chǎn)品包括標(biāo)準(zhǔn)品和空白對照，本試劑盒可進(jìn)行100個(gè)樣品的檢測。
原理：
鐵被還原劑還原成二價(jià)鐵，并與亞鐵嗪生成紫紅色化合物，在540-580nm處可比色測定。 其反應(yīng)如下圖所示：
組成：
1. 緩沖液： 5ml
2. 檢測劑： 3ml
3. 標(biāo)準(zhǔn)品： 1ml
4. 稀釋用液： 20ml
適用范圍：該試劑盒可用于血清，培養(yǎng)基中鐵離子定量檢測。
用戶自備：4.5%高錳酸鉀溶液5ml。
操作步驟：
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：用試劑盒提供的稀釋用液將3mM 的標(biāo)準(zhǔn)品母液稀釋為：300 uM、150uM、75uM、37.5uM、18.75uM、9.38uM、4.69uM。注意倍比稀釋并設(shè)置0濃度對照反應(yīng)管。
2. 將緩沖液與4.5%高錳酸鉀溶液按1:1混勻，稱為混液A。
3. 參考下表使用1.5ml離心管，設(shè)置空白對照管、標(biāo)準(zhǔn)品管和樣品管。如果樣品中的鐵元素含量過高，用裂解液適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行測定。
空白對照 | 稀釋后的標(biāo)準(zhǔn)品 | 裂解的樣品 | |
稀釋用液 | 100μl | － | |
混液A | 100μl | 100μl | 100μl |
樣品 | － | － | 100μl |
標(biāo)準(zhǔn)品工作液 | － | 100μl | － |
4. 混勻，60℃ 孵育1h。
5. 冷卻至室溫，將管蓋與管壁上的液滴離心入管底。
6. 加入30ul 鐵離子檢測劑，混勻，室溫孵育，30min。
7. 取200ul 于96孔板，在550nm測定吸光度。如果不能測定550nm，也可以在540nm~580nm范圍內(nèi)檢測。
8. 繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線并計(jì)算鐵離子濃度。
說明：
1. 本試劑盒不受錳離子、鎂離子、鎳離子和鋅離子等的干擾。
2. 操作過程中，樣品與試劑等避免與鐵器接觸，以防污染。
3. 所測樣本的值高于標(biāo)準(zhǔn)曲線的上限，應(yīng)稀釋樣品后重新測定。
4. 為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服、防護(hù)面罩并戴一次性實(shí)驗(yàn)手套操作，檢測試劑有腐蝕性，請小心操作，若不慎沾到皮膚上請馬上用清水沖洗干凈。
5. 該試劑盒僅供科學(xué)研究使用。
僅供科研實(shí)驗(yàn)用，不做其他用途！
